高效液相色谱仪设备是近30年发展起来的一种具有高灵敏度、高选择性的高效快速分离分析技术。它既能用于微量组分的分析测定,又能用于大量的制备分离,灵活多样,其应用范围已超过其他各种分离方法,尤其在中药样品的分析分离方面更充分发挥它的特长,为推动该领域的进步和发展作出了巨大贡献。
高效液相色谱仪设备组成
1、输液系统
包括溶剂柜、真空脱气机、溶剂混合器、高压泵等,其中核心部分是泵;泵的作用提供足够的驱动力使流动相通过填充紧密的色谱柱。
洗脱方式也分为两种:
(1)等度洗脱:在同一分析周期内流动相组成保持恒定,适合于组分数目较少,性质差别不大的样品。
(2)梯度洗脱:采用两种(或多种)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定程序连续改变流动相的浓度配比和极性的一种洗脱模式。用于分析组分数目多、性质差异较大的复杂样品。
2、进样系统
把分析试样有效地送入色谱柱进行分离。一般有自动进样器和手动进样器,进样量应不小于定量环体积的5-10倍(zui少3倍)。
3、分离系统
主要是色谱柱,色谱柱是一根装满填料的管子。色谱柱的材料有不锈钢、塑料、玻璃等,其尺寸(内径、长短)不尽相同;色谱柱填料主要有硅胶基质和聚合物基质,填料的粒径不尽相同。
4、检测器
对检测器的要求:灵敏度高、重现性好、线性范围宽、死体积小、对温度及流量的变化不敏感等。主要有紫外检测器、荧光检测器、示差检测器等。
示差检测器是一种通用型检测器,理论上可以检测几乎所有的化合物。其原理是基于含样品的洗脱剂和洗脱剂二者折光指数的差异。示差检测器受压力变化、温度变化、流动脉冲的影响较大,不适合进行梯度洗脱。