紫外可见分光度计选择性也比分光光度法好,这是由于:a 荧光分析仪器在与激发光相垂直的方向测量荧光,与分光光度在一直线上测量相比,消除了透射光的影响,测量更为准确,灵敏度高;b 吸光光度法只采用一个单色器,而荧光分析仪器有两个单色器,分别用于获得单色性较好的激发光和分出某一波长的荧光,消除其它杂散光的干扰,其仪器的准确度、灵敏度也更高;c 荧光测量中的激发光源比吸收光度法的光源有更大的发射强度,光源更稳定,因此其仪器的准确度、灵敏度也就更高,综上所述,荧光分光光度计荧光法的检出限优于吸光光度法。
紫外可见分光度计
核酸的定量是分光光度计使用频率高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。
测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。
主要特点:
● 完全由PC 控制操作,可灵活选配火焰、石墨炉原子化器。仪器的灯电流、负高压、工作波长和燃烧条件均由PC机菜单输入的高度自动化的光度计。
● 为吸光度、浓度、发射强度的测定提供连续、峰高和峰面积三种读数方式,具有原子吸收、背景吸收、扣背景校正、发射强度四种信号方式。
● 一体化悬浮式光学平台设计,使得光路系统抗震能力明显改善,即使*使用光信号依然能保持稳定。
● 灯架具有同时预热,自动旋转切换,自动点火,自动优化空心阴极灯的工作条件的功能。具有全自动波长扫描、自动增益、背景校正、能量自动平衡、按峰值检索方式自动寻峰等功能。