可见分光光度计仪器自检结束后(7个自检项目均出现OK字样),按[MAIN MENU]键(主菜单),屏幕显示如下5个功能项: 1. Phtometry(定量运算);2.Wavelength Scan(波长扫描模式);3.Time Scan(时间曲线扫描);4.System(系统校正);5.Data display(光度直接测量模式)。按相应选项前的数字键,即可进入该选项的下一级子菜单。
可见分光光度计
测量完毕后仪器将自动给出标准曲线,标准曲线下方有三项供选择:①Process(更改标准曲线的坐标和观察浓度回归曲线的数据);②Measure(直接进入样品的测量);③Print(打印浓度回归曲线谱图和数据),选中对应的数字就可执行相应的功能。
光度计基本使用方法:按“COTO”键,输入设定波长;四个比色皿,其中R位置放置参比试样,其余三个放入待测试样。将比色皿放入样品池内的比色皿架中,盖上样品池盖;将参比试样推入光路,按“ABS%”键,使仪器自动调零和置满度;然后将待测试样推入光路,显示试样的吸光度值;如果要想将待测试样的数据打印出,只需按“START/STOP”键即可。每天使用结束后,应仔细检查样品室内是否有溶液溢出,若有溢出必须随时用滤纸吸干;使用完毕,用防尘套罩住。
因为荧光分析法的灵敏度高,其检出限通常比分光光度法低2~4个数量级,选择性也比分光光度法好,这是由于:a 荧光分析仪器在与激发光相垂直的方向测量荧光,与分光光度在一直线上测量相比,消除了透射光的影响,测量更为准确,灵敏度高;b 吸光光度法只采用一个单色器,而荧光分析仪器有两个单色器,分别用于获得单色性较好的激发光和分出某一波长的荧光,消除其它杂散光的干扰,其仪器的准确度、灵敏度也更高;c 荧光测量中的激发光源比吸收光度法的光源有更大的发射强度,光源更稳定,因此其仪器的准确度、灵敏度也就更高,综上所述,荧光分光光度计荧光法的检出限优于吸光光度法。