北京众力挽生物科技有限公司
郝运兴
Thermo NanoDrop one紫外/可见分光光度计
检测时选择不同检测模式,可以得到zui快速的结果:
● Nucleic Acid – 吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸浓度。
● UV-Vis – 190~840nm间所有波长的吸收值及光谱(以1mm光径吸收值呈现)。
● A280蛋白质定量法 – 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质,须具有已知的质量消光系数(mass extinction coefficient)方可计算。
● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果,自动画出标准曲线并计算R square,待测蛋白质浓度。
* 蛋白质检测模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三种常见定量呈色剂,因呈色剂随时间会逐渐加深,使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品,在*时间内完成检测,以得到良好的标准曲线。每个标准曲线zui多可有七个标准品,每个标准品zui多可做五重复。
* 测蛋白质时样品体积需使用 2ul,每个样品检测后需以Kimwipes 低尘擦拭纸(编号: 34155 )擦拭15~20回,以避免呈色剂与蛋白质的残留。
浓度范围:
Thermo NanoDrop one紫外/可见分光光度计
样品种类 | zui低浓度 | zui高浓度 (超过时请稀释样品) | 再现性 (五重复以上) |
核酸 | 2 ng/ul | 15000 ng/ul (dsDNA) 12000 ng/ul (RNA) | 浓度范围在 2-100 ng/ul 时,SD为 ± 2 ng/ul 浓度范围大于 100 ng/ul 时,CV为 ± 2% |
纯BSA | 0.10 mg/ml | 100 mg/ml | 浓度范围在 0.05-10 mg/ml 时,SD为 ± 0.10 mg/ml 浓度大于 10 mg/ml 时,CV为 ± 2% |
蛋白质,以BCA方式定量 | 0.2 mg/ml | 8.0 mg/ml | CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然) |
蛋白质,以modified Lowry方式定量 | 0.2 mg/ml | 4.0 mg/ml | CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然) |
蛋白质,以Bradford方式定量 | 100 ug/ml | 8000 ug/ml | 浓度范围在 100-500 ug/ml 时,SD为 ± 25 ug/ml 浓度大于 500 ug/ml 时,CV为 ± 5% |
蛋白质,以Mini Bradford方式定量 | 15 ug/ml | 100 ug/ml | 浓度范围在 15-50 ug/ml 时,SD为 ± 4 ug/ml 浓度大于 50 ug/ml 时,CV为 ± 5% |
技术参数:
检测孔测量时:
1、波长范围: 190-840nm;
2、波长精度: 1nm;
3、分辨率: <1.8 nm (FWHM at Hg 253.7 nm);
4、其它: 1mm光程长度(可自动调整到0.05mm);
5、检测下限:2ng/μl(dsDNA);
6、检测上限:15000ng/μl(dsDNA);
7、吸光率精确度:0.002 absorbance (1mm光程);
8、吸光率准确性:2%(at 0.76 at 257 nm);
9、吸光率范围:0.02-300 (相当于10mm光程);
10、核酸检测周期:< 5s;
11、体积:14cm×20cm。
比色杯测量时:
1、光柱高度:8.5 mm;
2、控温精确,37 ± 0.5 °C;
3、搅拌速度: 150 – 850 rpm;
4、四种光径可供选择,分别为1,2,5,10mm;
5、吸光率范围:0.002 – 1.5;
6、检测下限:0.4 ng/μl (dsDNA);
7、检测上限:750 ng/μl (dsDNA);
8、检测时间:< 3 s;
9、重量:2.1 kg.